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ＰＣＲ反應(yīng)：
首先，在ＰＣＲ反應(yīng)管或板中組裝ＰＣＲ反應(yīng)混合物，包括待檢測的ＤＮＡ或ＲＮＡ模板、引物、熒光標(biāo)記的探針或染料、聚合酶等。
ＰＣＲ反應(yīng)過程包括變性、退火和延伸步驟，通過循環(huán)加熱和降溫來擴(kuò)增目標(biāo)ＤＮＡ或ＲＮＡ序列。
熒光信號檢測：
在ＰＣＲ反應(yīng)過程中，熒光標(biāo)記的探針或染料與目標(biāo)序列結(jié)合，產(chǎn)生熒光信號。
實(shí)時熒光定量ＰＣＲ分析儀通過光學(xué)系統(tǒng)檢測ＰＣＲ反應(yīng)管或板中的熒光信號，熒光信號的強(qiáng)度與ＰＣＲ產(chǎn)物的數(shù)量成正比。
數(shù)據(jù)采集和分析：
控制系統(tǒng)通過控制溫度循環(huán)和光學(xué)系統(tǒng)，實(shí)時監(jiān)測ＰＣＲ反應(yīng)過程中的熒光信號。
數(shù)據(jù)分析軟件會記錄并分析熒光信號的變化，繪制熒光信號曲線，根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線計算出樣本中目標(biāo)序列的起始數(shù)量。
定量分析：
通過比較待檢測樣本的熒光信號與標(biāo)準(zhǔn)曲線上的對應(yīng)值，可以確定待檢測樣本中目標(biāo)序列的起始數(shù)量。
實(shí)時熒光定量ＰＣＲ分析儀可以提供定量結(jié)果，通常以基因拷貝數(shù)或相對表達(dá)量的形式呈現(xiàn)。
結(jié)果輸出：
分析軟件可以將定量結(jié)果輸出到計算機(jī)或打印機(jī)，以便后續(xù)數(shù)據(jù)分析和報告生成。
結(jié)果通常包括目標(biāo)序列的數(shù)量、ＰＣＲ曲線、熒光信號曲線等信息。
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