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準備工作
樣本準備：收集需要檢測的組織樣本，通常為病理切片或涂片。
染色劑準備：準備石炭酸復紅（ｃａｒｂｏｌ ｆｕｃｈｓｉｎ）作為初染劑，以及鹽酸酒精（ＨＣｌ乙醇）作為脫色劑，以及美藍（ｍｅｔｈｙｌｅｎｅ ｂｌｕｅ）作為復染劑。
染色步驟
初染：將樣本放入抗酸染色機中，加入適量的石炭酸復紅染色液，讓樣本在染色液中浸泡一段時間，通常為１５－３０分鐘。染色液的溫度應保持在室溫。
脫色：將樣本從染色液中取出，立即放入鹽酸酒精中進行脫色，脫色時間通常為１－２分鐘，直到樣本呈現透明或淡黃色。
復染：將樣本從脫色液中取出，立即放入美藍染色液中進行復染，通常為１－２分鐘。美藍染色液的溫度也應保持在室溫。
清洗：將樣本從美藍染色液中取出，用蒸餾水或生理鹽水清洗干凈，直到清洗液不再呈現藍色。
觀察與記錄
顯微鏡檢查：將清洗后的樣本置于顯微鏡下觀察。抗酸性細菌在石炭酸復紅染色后呈現紅色，在美藍復染后呈現藍色，而非抗酸性細菌則僅在美藍復染后呈現藍色。
結果記錄：記錄下觀察到的細菌形態、分布和數量，特別是抗酸性細菌的特征。
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